شناسایی آسپرژیلوس های موجود در هوای مناطق تهران با استفاده از ویژگیهای مورفولوژیک و تکنیک ملکولی rflp

در این مطالعه با استفاده از تلفیق روش مورفولوژیک، تعیین توالی نواحی its1/its4 و تکنیک ملکولی rflp، گونه های آسپرژیلوس موجود در هوای مناطق 22 گانه تهران شناسایی گردیدند. نمونه برداری از هوای تهران به روش پلیت باز انجام گرفت. شایعترین عوامل قارچی جدا شده به ترتیب فراوانی شان متعلق به جنس های : آسپرژیلوس (3/31%)، کلادوسپوریوم (1/22%)، پنی سیلیوم (8/13%) و آلترناریا (2/12%) بودند. با استفاده از تلفیق روش های مورفولوژیک و تعیین توالی نواحی its1/its4، مشاهده شد که آسپرژیلوس های جداسازی شده متعلق به 12 گونه شامل آسپرژیلوس نیجر (30%)، آسپرژیلوس فلاووس (1/19%)، آسپرژیلوس ژاپونیکوس (8/11%)، آسپرژیلوس توبینجنسیس (17%)، آسپرژیلوس آمستلودامی (3/5%)، آسپرژیلوس اوریزه ای (2/5%)، آسپرژیلوس فومیگاتوس (6/4%)، آسپرژیلوس اخراسئوس (3/3%)، آسپرژیلوس ترئوس (6/2%)، آسپرژیلوس فلاویپس (6/2%)، آسپرژیلوس ورسیکالر (2%) و آسپرژیلوس نیدولانس (6/1%) بودند. محصول pcr که با استفاده از پرایمرهای its1/its4بدست آمده بود تحت تاثیر آنزیم های برش دهنده ecor1 و taq1قرار گرفت و مشاهده شد که الگوی قطعات حاصل از اثر آنزیمecor1 در تمامی گونه ها مشابه بوده و ایجاد قطعه 300جفت بازی می کند همچنین مشاهده شد که الگوی قطعات حاصل از اثر آنزیم taq1 در گونه های ترئوس، فلاووس، آمستلودامی، توبینجنسیس، نیجر، ورسیکالر و اوریزه ای بسیار مشابه می باشد و تمامی گونه های مذکور قطعات سه باندی حدود 60 جفت باز، 160 جفت باز و 210جفت بازی تولید می کنند در حالیکه الگوی قطعات حاصل از اثر آنزیم taq1 در سایر گونه ها متفاوت می باشد بطوریکه در آسپرژیلوس فلاویپس 4 قطعه با اندازه های حدود 60، 90، 150 و 190 جفت باز، در آسپرژیلوس اخراسئوس 2 قطعه با اندازه های حدود 60 و 180 جفت باز، در آسپرژیلوس ژاپونیکوس سه قطعه با اندازه های حدود 60، 120 و 220 جفت باز، در آسپرژیلوس نیدولانس سه قطعه با اندازه های حدود 60، 180 و 200 جفت باز و در آسپرژیلوس فومیگاتوس دو قطعه با اندازه های حدود 80 و 140 جفت باز ایجاد گردید. نتایج بدست آمده نشان داد که آنزیم taq1 با ایجاد 6 الگوی باندی متفاوت منجر به افتراق 5 گونه آسپرژیلوس فلاویپس،آسپرژیلوس اخراسئوس، آسپرژیلوس ژاپونیکوس، آسپرژیلوس نیدولانس و آسپرژیلوس فومیگاتوس از یکدیگر و سایر گونه ها می گردد. با توجه به نقش بارز آسپرژیلوسها در ایجاد انواع بیماریها نظیر آسپرژیلوزیس مهاجم، آسپرژیلوما و...، شناسایی پراکندگی و شیوع گونه های غالب، حائز اهمیت است و راه اندازی یک سیستم تشخیص ملکولی بر اساس تکنیکهایی نظیر تعیین توالی نوکلئوتیدی نظیر ناحیه its1/4 و rflp، اطلاعات جامعی در خصوص تعیین الگوی جمعیتی این جنس قرار می دهد که می تواند در برنامه ریزیهای موثر با هدف جلوگیری و کنترل عفونتهای ناشی از گونه های آسپرژیلوس راهگشا باشد. کلید واژه: گونه های آسپرژیلوس، شناسایی مورفولوژیک، تعیین توالی، تکنیک ملکولی rflp.